索氏抽提法測定糧食中粗脂肪時應注意的問題

脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實中，測定脂肪的含量，可以作為鑒別其品質優劣的一個指標。脂肪含量的測定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測和核磁共振法等。目前國內外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractormethod）是公認的經典方法，也是我國糧油分折首選的標準方法。用索氏抽提法測定粗脂肪是最常用方法之一，但在使用中需要注意的方面很多。

1、樣品的前處理

一般采集或送檢的樣品都有500~1000g左右，因此在粉樣前應先將樣品在樣品盤中用四分法反復混合均勻，原糧用糧食分樣器按操作規程分取樣品。在粉碎過程中應盡量避免樣品發熱，若樣品在粉碎過程中發熱，應注意等完全冷卻至室溫后再稱樣。試樣粗細度要適宜。試樣粉未過粗，脂肪不易抽提干凈;試樣粉末過細，則有可能透過濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測定結果。有條件的建議使用錘式旋風磨，效果較好。

2、稱取樣品

稱樣前應提前30min開啟天平，稱取樣品時，不要將樣品放在定性濾紙上直接稱量，而應放在無水硫酸紙上稱量，因為定性濾紙吸水性太強，易造成誤差。樣品由于粗脂肪含量各不相同，因此在稱取時不同的料稱樣量也有差異，一般粗脂肪含量在10%以上的每個平行樣只需稱取1.5～2.0g，若在10%以下需稱取2.0～3.0g，定量稱取好的樣品應用濾紙筒完全包好，裝樣品的濾紙筒一定要緊密，最好在樣品上方加一層脫脂棉;含多量糖及糊精的樣品，要先以冷水處理，等其干燥后連通濾紙一起放入濾紙筒。用脫脂線繩扎緊確保樣品不會漏出，濾紙包應盡量緊湊，長度不能長于索氏脂肪提取器提取室的高度。稱取好的樣品應在烘箱105~C士2℃烘2h以除去其中的水分。

那艾儀器 智能索氏提取器 型號：NAI-ST-6S

3、做好抽提準備

(1）抽提瓶在使用前應先檢查完全干凈后放人2~3粒干凈的沸石再放到烘箱中于105℃+2°℃烘2h，然后放于干燥器中冷30min，帶上干燥潔凈的手套稱取抽提瓶的重量，反復直至恒重(前后兩次稱量差不超過0.00o2g)，要求兩次烘干和干燥時間一致，第二次烘干時間不宜過長。

(2）使用索氏脂肪提取器前應先檢查提取室應干燥無水再用。水浴鍋在使用前應檢查水面高度應達鍋高的三分之二以上，要保證水面的高度超過提取瓶中乙醚的高度。冷凝管上端最好連接一個氯化鈣干燥管，這樣不僅可以防止空氣中水分進入，而且還可以避免乙醚揮發流失在空氣中，也可防止實驗室微小環境空氣的污染，如無此裝置，塞一團干脫脂棉球亦可。

(3)水浴鍋的溫度應設在60℃左右?；亓鞯目偞螖禐?0～60次，每小時8~12次，時間為8個小時，含油高的樣品回流次數可增加至70次。加入乙醚的量一般為60~100ml。安裝抽提設備時應注意抽提瓶和抽提室之間、抽提室和冷凝管之間的摩沙口一定要旋轉擰緊，連接后用洗瓶滴水檢查是否嚴密。

(4)乙醚必須使無水乙醚，因為如果含有其他的物質，如水，就可能將樣品中的糖分或者無機物抽出，影響脂肪的測定結果。索氏抽提法測定脂肪最大的不足是耗時過長，如能將樣品先回流1~2次，然后浸泡在溶劑中過夜，次日再繼續抽提，則可明顯縮短抽提時間。

4、抽提

在抽提過程中，經常發生的問題是:

(1)各冷凝管之間連接的膠管因使用時間過長老化而被忽視常常發生漏水現象，在使用前應注意檢查，及時更換。在抽提過程中一定要注意各冷凝管之間連接的膠管擺放通暢，否則會影響冷凝管中水的流通，導致發生乙醚揮發流失的情況，因此在提取的過程中一定要經常觀察水流是否通暢，水壓是否穩定。有異?，F象要及時調整，實驗中經常因連接膠管擺放不暢使回水不通，乙醚流失停止回流。

(2)必須十分注意乙醚的安全使用。抽提室內嚴禁有明火存在或用明火加熱。乙醚中不得含有過氧化物，保持抽提室內良好通風，以防燃爆。乙醚中過氧化物的檢查方法是:取適量乙醚，加入碘化鉀溶液，用力搖動，放置1min，若出現黃色則表明存在過氧化物，應進行處理后方可使用。處理的方法是:將乙醚放入分液漏斗，先以1/5乙醚量的稀KOH溶液洗滌2~3次，以除去乙醇;然后用鹽酸酸化，加入1/5乙醚量的FeSO4或Na2SOa溶液，振搖，靜置，分層后棄去下層水溶液，以除去過氧化物;最后用水洗至中性，用無水CaCl:或無水Na2SO4脫水，并進行重蒸餾。

5、回收

(1)回流前往提取室加乙醚或回流結束回收乙醚時注意打開通風系統。以盡量減少乙醚揮發對人體的危害。抽提結束后回收乙醚，小心地從水浴鍋中將底瓶放穩在實驗臺上，回收時最好有兩個人配合操作，確保達到萬無一失。

(2）回收的乙醚不能再用于抽提粗脂肪，應在乙醚瓶外標明。將抽提室中的濾紙包倒出后，抽提室不要水洗即可放置在適當的地方。

(3）用濾紙或脫脂棉擦凈提取瓶的外部然后放于烘箱中于105℃±+2℃烘2h，取出放于干燥器中半個小時后稱重，再將提取瓶放于烘箱中烘30min冷卻后稱量，兩次稱量差不超過0.0002g即為恒重。將提取瓶放在烘箱內干燥時，瓶口向一側傾斜45度防止揮發物乙醚易與空氣形成對流，這樣干燥迅速。這里恒重的概念有區別，它表示最初達到的最低重量，即溶劑和水分完全揮發時的恒重，此后若在繼續加熱，則因油脂氧化等原因會導致重量增加。在干燥器中的冷卻時間一般要一致。此時烘干時間不宜過長，因為一些不飽和脂肪酸，容易在加熱過程中被氧化而影響脂肪測定的最終結果。在沒有真空干燥箱的條件下，只可以在100～105℃下干燥1.5～3小時。

6、測定結果

樣品含量在10%以上時，相對偏差允許3%;在10%以下時，允許相對偏差5%。否則重做。